項目?jì)热莞攀?br />RNA干擾(RNAi,RNA Interference)是抵御外來(lái)病毒侵犯的一種防御機制,廣泛應用于功能基因組學(xué)、基因治療、靶藥物篩選、細胞信號通路分析、蛋白質(zhì)互作等領(lǐng)域。具體來(lái)說(shuō),當dsRNA或pre-miRNA進(jìn)入細胞后,能夠被特異的核酸內切酶(Dicer)識別并切割成為很小的片段,這些片段在解旋酶的作用下會(huì )解鏈。反義鏈在與體內一些酶結合形成RNA誘導的沉默復合物(RNA-Induced Silencing Complex,RISC),RISC與mRNA同源區進(jìn)行特異性結合,若miRNA與mRNA的結合位點(diǎn)能夠*配對,則會(huì )切割mRNA;若miRNA與mRNA的結合位點(diǎn)不能夠*配對,則會(huì )抑制mRNA的翻譯過(guò)程。
目前實(shí)驗中主要采用miRNA、 shRNA 和siRNA 3種RNA干擾方法。shRNA是利用人源或鼠源的RNA聚合酶III(pol III)啟動(dòng)子,對編碼短干擾RNA(siRNA)的DNA序列進(jìn)行轉錄來(lái)實(shí)現RNA干擾。轉錄后的shRNA經(jīng)加工,參與RISC的形成。與人工合成的siRNA相比,shRNA可以在較長(cháng)時(shí)間內有效抑制細胞內靶基因的表達。miRNA是一類(lèi)可以通過(guò)RNAi機制調節基因表達的內源性小RNA,人工miRNA與shRNA的設計原理基本相同,由于miRNA具有內源性,因此其更易產(chǎn)生有效的基因沉默。
我們擁有一系列shRNA/miRNA表達載體以及Sponge載體,同時(shí)提供包括shRNA/miRNA設計、慢病毒包裝、陽(yáng)性克隆鑒定、單克隆培養、基因沉默細胞系構建等一系列實(shí)驗服務(wù)內容。
實(shí)驗流程
1、細胞預實(shí)驗。
2、慢病毒載體構建。
3、shRNA/miRNA功能驗證。
4、慢病毒包裝。
5、RNAi細胞系構建。
6、沉默效果檢測。
我們的優(yōu)勢
1、提供各種實(shí)驗材料和儀器,滿(mǎn)足項目課題實(shí)驗需要。
2、專(zhuān)業(yè)的操作人員。
3、高規格實(shí)驗室。
4、數據結果交付周期快。
5、完善的服務(wù)體系,全程跟進(jìn),確保滿(mǎn)意。
服務(wù)流程
1、提交項目課題相關(guān)需求和資料。
2、與我們的專(zhuān)業(yè)技術(shù)團隊討論項目細節。
3、根據討論后的意見(jiàn)對實(shí)驗方案進(jìn)行修改。
4、雙方均滿(mǎn)意并達成一致,簽訂技術(shù)服務(wù)合同。
5、開(kāi)展實(shí)驗,按期完成合同規定的內容。
6、結題,提供實(shí)驗原始結果和分析結果、實(shí)驗流程、實(shí)驗條件等等。
咨詢(xún)與訂購
感謝您選擇我們的服務(wù),如果您有任何問(wèn)題,請聯(lián)系我們,我們將竭誠為您解答和服務(wù)。
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