如何區分各種PCR技術(shù)？

PCR是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，PCR技術(shù)有很多，那么我們應該如何區分各種PCR技術(shù)呢？讓我們一起來(lái)看看吧！

一、普通PCR

PCR是普通PCR，以雙鏈DNA為模板，以dNTP為底物，特異性地擴增雙鏈DNA。然后采用瓊脂糖凝膠電泳對產(chǎn)物進(jìn)行檢測，只能做定性分析。

二、實(shí)時(shí)熒光定量PCR

qPCR和Real-time PCR是實(shí)時(shí)熒光定量PCR，以cDNA為模板，以dNTP為底物，對擴增出的DNA進(jìn)行定量分析。實(shí)時(shí)熒光定量PCR常用的方法：水解探針?lè )ê蜔晒馊玖戏ā?/p>

三、逆轉錄PCR

RT-PCR 是逆轉錄PCR，采用 Oligo（dT） 或隨機引物利用逆轉錄酶反轉錄成 cDNA，再以 cDNA 為模板進(jìn)行 PCR 擴增，結果只能定性，不能定量。

四、實(shí)時(shí)熒光定量逆轉錄PCR

RT-qPCR是實(shí)時(shí)熒光定量逆轉錄PCR，是qPCR+RT-PCR的組合，將總RNA或mRNA逆轉錄成cDNA后再作為模板，以dNTP為底物，進(jìn)行qPCR的定量分析。

五、數字PCR

dPCR是數字PCR即三代PCR，是一種能夠實(shí)現核酸絕對定量的精準檢測技術(shù)，基于泊松分布原理將核酸樣品分配到大量獨立、平行的微反應單元（納升級）中，使每個(gè)反應室中平均只有一個(gè)拷貝或者沒(méi)有目標DNA分子，然后加入熒光信號進(jìn)行擴增，從而實(shí)現靶標核酸分子的絕對計數，提高檢測靈敏度和準確度。

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