AcceGen是一家美國生物技術(shù)公司。成立于2016年,位于新澤西州費爾菲爾德,AcceGen提供完整和精確的細胞產(chǎn)品和科研服務(wù)。AcceGen為客戶(hù)開(kāi)發(fā)了專(zhuān)有的原代細胞永生化服務(wù)科研服務(wù)。
Caco-2 (人結直腸腺癌細胞)分離自一位72歲男性直腸原位癌,人結腸癌Caco-2細胞系在標準培養條件下匯合后,自發(fā)分化為腸上皮樣細胞,是常用的腸癌細胞模型。Caco-2細胞分離自直腸原位癌;當長(cháng)到滿(mǎn)時(shí),Caco-2細胞表現出特征性的腸上皮細胞分化。Caco-2細胞表達維甲酸結合蛋白I和維甲酸結合蛋白Ⅱ,并呈角質(zhì)蛋白陽(yáng)性。下面讓我們一起來(lái)看看AcceGen人結直腸腺癌細胞Caco-2細胞的培養要點(diǎn)吧!
1. 細胞不貼壁怎么辦
Caco-2細胞培養基里添加的胎牛血清比例為20%,當血清比例降低,貼壁性下降時(shí),補充胎牛血清至20%,繼續培養1-2天,細胞即可貼壁。檢查培養基是否偏堿(呈紫紅色),偏堿的培養基可能導致細胞無(wú)法貼壁。
2. 能否用DMEM替代MEM
可以。DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)是在MEM培養基的基礎上研制的。Caco-2細胞在DMEM+20%FBS+1%P/S條件下生長(cháng)狀態(tài)正常。
3. MEM中不含NEAA會(huì )怎樣
當使用不含NEAA的MEM培養基時(shí),Caco-2生長(cháng)速度可能下降,漂浮細胞增多。
4. 細胞消化不下來(lái)怎么辦
如果消化5-10分鐘,細胞部分脫落,另一部分仍然貼壁緊密,可以將脫落細胞轉移至離心管,向原瓶中加入新的胰酶,放入培養箱繼續消化剩余細胞,每隔1min拿出來(lái)觀(guān)察,直到細胞滑落。
5. 漂浮細胞多怎么辦
有少量發(fā)亮的細胞漂浮或黏附在細胞克隆上,是正常的,隨后會(huì )進(jìn)入克隆并正常生長(cháng)。所以避免頻繁觀(guān)察細胞,可以減少漂浮細胞產(chǎn)生。
如果Caco-2細胞隨著(zhù)培養過(guò)程,漂浮得越來(lái)越嚴重,甚至大塊兒飄起,就要檢查培養基成分、培養環(huán)境是否出現異常了。
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