產(chǎn)品介紹:
Cell Counting Kit-8,簡(jiǎn)稱(chēng)CCK-8試劑盒或CCK8試劑盒,是一種基于WST-8而廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速、高靈敏度檢測的試劑盒。
WST-8是一種類(lèi)似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線(xiàn)粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan(參考圖1)。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細胞,顏色的深淺和細胞數目呈線(xiàn)性關(guān)系。
圖1. WST-8檢測原理圖 (EC=electron coupling reagent,即電子耦合試劑)
WST-8是MTT的一種升級替代產(chǎn)品,和MTT或其它MTT類(lèi)似產(chǎn)品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點(diǎn)。首先,MTT被線(xiàn)粒體內的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液來(lái)溶解;而WST-8和XTT、MTS產(chǎn)生的formazan都是水溶性的,可以省去后續的溶解步驟。其次,WST-8產(chǎn)生的formazan比XTT和MTS產(chǎn)生的formazan更易溶解。再次,WST-8比XTT和MTS更加穩定,使實(shí)驗結果更加穩定。另外,WST-8和MTT、XTT等相比線(xiàn)性范圍更寬,靈敏度更高。
WST-8和WST-1相比,檢測靈敏度更高,更易溶解,并且更加穩定。
本試劑盒可以用于細胞因子等誘導的細胞增殖檢測,也可以用于抗癌藥物等對細胞有毒試劑誘導的細胞毒性檢測,或一些藥物誘導的細胞生長(cháng)抑制檢測。
本試劑盒檢測非常便捷。試劑盒僅一管已經(jīng)配制好的含有WST-8的CCK-8溶液,無(wú)須再進(jìn)行任何配制等操作。無(wú)須使用同位素,所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內完成。不必洗滌細胞,不必收集細胞,也不必采用額外的步驟去溶解formazan??梢杂糜诖笈繕悠返臋z測。
酚紅和血清對本試劑盒的測定無(wú)明顯影響。
WST-8對細胞無(wú)明顯毒性。加入CCK-8溶液顯色后,可以在不同時(shí)間反復用酶標儀讀板,使檢測時(shí)間更加靈活,便于找到最佳測定時(shí)間。
產(chǎn)品屬性:
保存條件:4℃避光保存一年有效,-20℃避光保存兩年有效。
注意事項:
(1)由于使用96孔板進(jìn)行檢測,如果細胞培養時(shí)間較長(cháng),一定要注意蒸發(fā)問(wèn)題。一方面,由于96孔板周?chē)蝗ψ钊菀渍舭l(fā),可以采取棄用周?chē)蝗Φ霓k法,改加相同量的PBS、水或培養液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培養箱內水源的地方,以緩解蒸發(fā)。
(2)本試劑盒的檢測依賴(lài)于脫氫酶催化的反應,所以還原劑(例如一些抗氧化劑)會(huì )干擾檢測,如果待檢測體系中存在較多的還原劑,需設法去除。
(3)用酶標儀檢測前需確保每個(gè)孔內沒(méi)有氣泡,否則會(huì )干擾測定。
產(chǎn)品訂購:
貨號 | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規格 |
C0038 | Cell Counting Kit-8(CCK-8試劑盒) | 500次 |
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