碧云天總SOD活性檢測試劑盒(S0101S)產(chǎn)品介紹

碧云天總SOD活性檢測試劑盒(S0101S)是一種基于WST-8的顯色反應，通過(guò)比色來(lái)檢測細胞、組織或其它樣品中SOD即超氧化物歧化酶活性的試劑盒。

目前測SOD 活性測定法有多種，最初的核黃素法、到 NBT(氮藍四唑)法，NBT產(chǎn)生的甲臜染料水溶性差，易和被還原的黃嘌呤氧化酶相互作用，抑制百分率達不到 100%等，從而使檢測的靈敏度和精確度受到影響；本試劑盒采用的是目前穩定性更好、靈敏度更高的改性WST法即 WST-8法，改性的 WST 可以和黃嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase, XO)催化產(chǎn)生的超氧化物陰離子(O 2 .- )反應產(chǎn)生水溶性的甲臜染料，后者在 450nm 處有最大吸收。

使用說(shuō)明：

1.樣品的準備：

細胞樣品的準備：對于貼壁細胞，吸凈細胞培養液，用4℃或冰浴預冷的PBS或生理鹽水洗滌一遍，按照每100萬(wàn)細胞加入100-200微升的比例加入本試劑盒提供的SOD樣品制備液，適當吹打以充分裂解細胞；對于懸浮細胞，600g離心5分鐘收集細胞，用4℃或冰浴預冷的PBS或生理鹽水洗滌一遍，按照每100萬(wàn)細胞加入100-200微升的比例加入SOD樣品制備液，適當吹打，以充分裂解細胞。4℃約12,000g離心3-5分鐘，取上清作為待測樣品。

2.試劑盒的準備工作：

WST-8/酶工作液的配制：按照每個(gè)反應160μl的體積配制適量的WST-8/酶工作液。均勻混合151μl SOD檢測緩沖液、8μl WST-8和1μl酶溶液，即可配制成160μl WST-8/酶工作液。根據待檢測樣品(包括標準品)的數量，配制適量的WST-8/酶工作液。配制好的WST-8/酶工作液4℃或冰浴保存，可以在當天使用，但建議盡量現配現用。

3.樣品測定：

使用96孔板設置樣品孔和各種空白對照孔。依次加入待測樣品和其它各種溶液。加入反應啟動(dòng)工作液后充分混勻。注意：加入反應啟動(dòng)工作液后反應即會(huì )開(kāi)始，可以在低溫操作或用排槍操作以減小各孔間因加入反應啟動(dòng)工作液的時(shí)間先后差異而導致的誤差。

產(chǎn)品選購：