原代食管癌*培養基

產(chǎn)品名稱(chēng)：原代食管癌*培養基（Human Esophagus Carcinoma Cell Medium）
產(chǎn)品說(shuō)明：原代食管癌*培養基（Human Esophaqus Carcinoma Cell Medium）是一種為促進(jìn)食管癌原代細胞體外生長(cháng)而設計的培養基。它是一種無(wú)菌的液體混合系統，含有必需和非必需的氨基酸、維生素、有機和無(wú)機化合物、激素、生長(cháng)因子、微量礦物質(zhì)。培養基基于碳酸氫鹽的緩沖體系，在5%CO2/95%空氣的培養箱中平衡時(shí)，pH值為7.4。該培養基的配方可以提供一個(gè)理想平衡的營(yíng)養環(huán)境，選擇性地促進(jìn)體外人食管鱗癌原代細胞的生長(cháng)。

產(chǎn)品優(yōu)勢：
(1) 培養成功率高

(2) 體外持續擴增

(3) 保持腫瘤原始病理特征

(4) 藥敏結果宇臨床數據接近

使用說(shuō)明
?使用前準備
（1）DMEM/F12培養基稀釋后的基質(zhì)膠（Corning#356231）（100倍稀釋?zhuān)?/span>
（2）15mL無(wú)菌離心管、移液器、移液管、無(wú)菌槍頭等表面消毒后放入超凈工作臺中紫外照射30min。
（3）提前30min從4℃冰箱取出*培養基平衡至室溫。
?食管癌原代細胞培養
（1）至少提前半小時(shí)使用稀釋后的基質(zhì)膠預鋪培養瓶/板，使用前吸干基質(zhì)膠，用稀釋液潤洗一遍。
（2）將分離并計數后的細胞懸液參考表1中細胞數量接種于培養瓶/板，補加*培養基至所需體積，輕輕搖晃混勻，表面消毒后置培養箱，37℃、5%CO2條件培養。
（3）原代細胞初次接種后2-3天內勿動(dòng)（利于細胞貼壁），第一次換液建議換半液。

?食管癌原代細胞傳代
（1）鏡下觀(guān)察細胞形成克隆，且匯合度達到80~90%時(shí)即可傳代。
（2）培養箱中取出細胞，棄舊培養液，加入適量0.05%胰酶，37℃孵育，5min后拿出輕拍培養瓶/板側面，顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況。
（3）細胞消化至細胞變圓并開(kāi)始脫落時(shí)用終止培養基終止消化，并將細胞轉移至離心管中，1500rpm離心3 min。
（4）棄上清，以1-2mL*培養基重懸細胞，活細胞計數，將細胞懸液按適合的細胞密度接種于培養瓶/板，補加*培養基至所需體積，輕輕搖晃混勻，表面消毒后置培養箱，37℃、5% CO2條件培養。
注意事項：
1.本產(chǎn)品在使用前需平衡至室溫。
2.用產(chǎn)品時(shí)應注意無(wú)菌操作，避免污染。
3.本產(chǎn)品中不含血清，含原代細胞專(zhuān)用抗生素，無(wú)需額外添加抗生素。
4.為保持本產(chǎn)品的理想使用效果不宜將其過(guò)夜放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。5.請于保質(zhì)期內使用本產(chǎn)品，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
6.樣本需為食管鱗德術(shù)中樣本，且腫瘤細胞比例越高（至少>50%），培養成功率越高，不推薦用于少量樣本（如內鏡和循環(huán)腫瘤細胞）的培養。
7.本產(chǎn)品僅用于科研用途，不能用于體外診斷。