胎牛血清是一種常用的細胞培養基添加劑,通常用于增強細胞的生長(cháng)和增殖能力。那么你知道胎牛血清在使用過(guò)程中的注意事項有哪些嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!
一、如何儲存和解凍血清才不會(huì )使產(chǎn)品質(zhì)量受損
血清解凍時(shí)應將血清從-15~-70℃的低溫冰箱中取出放入4℃冰箱解凍1天,待全部解凍后再分裝。解凍過(guò)程中請不時(shí)搖勻(小心勿造成氣泡),使血清成分和溫度均勻,從而減少沉淀的產(chǎn)生。若一次無(wú)法用完一瓶,建議無(wú)菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍,并避免反復凍融。需要長(cháng)期保存的血清必須儲存于-20℃到-70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過(guò)1個(gè)月。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會(huì )變得渾濁,同時(shí)血清中的有效成分會(huì )被破壞,而影響血清質(zhì)量。
二、有時(shí)在血清中見(jiàn)到的絮狀沉淀可能是些什么物質(zhì)
主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會(huì )影響血清本身的質(zhì)量,可用400 xg離心5 min去除,也可不用處理。
三、如何避免血清中產(chǎn)生沉淀
(1) 解凍血清時(shí),請隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
(2) 血清分裝凍存時(shí),須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。
(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結而發(fā)生沉淀。
(4) 勿將血清置于37℃太久,否則血清會(huì )變得渾濁,同時(shí)血清中許多較不穩定的成份也會(huì )因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。
(5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,無(wú)須做此步驟。
(6) 若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高,時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻,都會(huì )造成沉淀物的增多。
四、熱滅活對血清的作用是什么
熱滅活步驟能夠滅活補體系統。補體會(huì )參與以下事件中:溶解細胞事件,平滑肌收縮,肥大細胞與血小板釋放組胺,吞噬作用增強,趨化作用,淋巴細胞與巨噬細胞的活化等。
五、加到培養基中的血清必須滅活嗎
不是必須的,看做什么實(shí)驗。如果用于培養普通細胞,血清一般是不需要滅活的,這樣可以有效保存血清中的生長(cháng)因子。但是如果用于培養一些表面具有補體受體的細胞,如內皮細胞,血清是需要滅活,一般是56℃,30min。
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